如果你曾經(jīng)使用過二氧化碳培養(yǎng)箱很長時(shí)間,你可能會(huì)遇到污染的某一點(diǎn)。根據(jù)Thermo Fisher Scientific(Waltham,MA)的全球細(xì)胞培養(yǎng)**Mary Kay Bates,“我們的現(xiàn)場調(diào)查告訴我們,全球87%的實(shí)驗(yàn)室工作人員每年**少有一次細(xì)胞培養(yǎng)物污染事件,許多有多個(gè)。“她補(bǔ)充說,實(shí)驗(yàn)室的人通常會(huì)造成污染。“微生物是我們不變的伴侶,我們對我們的皮膚,在我們的嘴里等進(jìn)行數(shù)萬億次。”Bates解釋說。除此之外,微生物在實(shí)驗(yàn)室中堵塞空氣,每立方米中有30到1000個(gè)。“所以每次培養(yǎng)箱門打開,都有污染的風(fēng)險(xiǎn),”貝茨說。問題是,你怎么打這個(gè)?
其他**還指出了二氧化碳中污染的普遍問題。The Baker公司(Sanford,ME)的營銷經(jīng)理Cheri Gaudet說:“這是一個(gè)普遍和嚴(yán)重的問題,對生命科學(xué)研究的完整性的真正威脅。”Gaudet還指出了一些其他的關(guān)注問題,意外或意外的事件可能在室內(nèi)引入污染,包括板或燒瓶的撞擊,或者敲入架子的菜。“她補(bǔ)充說,”同樣關(guān)注的是交叉污染,其中文化相互污染,污染的培養(yǎng)物被引入到室中并且污染擴(kuò)散。
對于許多二氧化碳,用HEPA過濾器過濾空氣提供了抵抗污染的關(guān)鍵元素。只是有一個(gè)良好的過濾器,但是,是不夠的。“只是說一個(gè)單位提供[HEPA過濾器]并不意味著設(shè)計(jì)是有效的,”貝茨說。“需要主動(dòng)氣流循環(huán),但它必須溫和分布,以便培養(yǎng)物不會(huì)變干。
新的Thermo Scientific THRIVE主動(dòng)氣流系統(tǒng)每分鐘過濾整個(gè)腔室空氣量,并在門打開30秒后的5分鐘內(nèi)提供ISO 5無塵室條件。正如貝茨說的,“仔細(xì)研究這些技術(shù)以及培養(yǎng)箱如何快速清潔室內(nèi)環(huán)境非常重要,而不僅僅是它具有HEPA過濾。
CO2培養(yǎng)箱中的空氣的其他方面也是重要的。正如Gaudet所說,“使用閉環(huán)控制算法來調(diào)節(jié)相對濕度可以防止冷凝,這是污染的主要原因。”她補(bǔ)充說,“閉環(huán)控制算法主動(dòng)對室內(nèi)的氣氛進(jìn)行采樣,并使用數(shù)據(jù)收集實(shí)現(xiàn)并保持濕度設(shè)定點(diǎn)。
為了使?jié)穸瓤刂票M可能容易,尋找使用霧化器的二氧化碳。“這項(xiàng)技術(shù)消除了對水盤的需要和污染的風(fēng)險(xiǎn),通常隨之而來,”Gaudet說。“此外,垂直的,單向的向下氣流是二氧化碳的新技術(shù); 它防止可能使空氣傳播的污染物擴(kuò)散到整個(gè)室的湍流。
二氧化碳培養(yǎng)箱的內(nèi)部也很重要; 例如,銅表面可以幫助。Bates說,“Thermo Scientific二氧化碳只使用100%純銅,質(zhì)量**好,維護(hù)方便”。其他培養(yǎng)箱部件的細(xì)節(jié)也很重要。正如Gaudet指出的,“加熱的室內(nèi)玻璃門是無霧的,這不僅有助于防止玻璃上的污染物的生長,而且消除了打開門以觀察培養(yǎng)物的需要,降低了空氣中顆粒污染的風(fēng)險(xiǎn)。
Baker's Cultivo培養(yǎng)箱包括無霧內(nèi)門和一系列其他抗污染功能。“事實(shí)上,”Gaudet說,“我們稱之為Cultivo”污染預(yù)防劑“,因?yàn)樗鋫淞艘幌盗形廴绢A(yù)防和控制技術(shù)。”包括InteliCELL,Baker專有的控制算法,調(diào)節(jié)濕度,溫度和CO 2水平。根據(jù)Gaudet,它“幾乎消除了污染物可以生長和擴(kuò)散的冷凝區(qū)域。
**終,數(shù)據(jù)**重要。Gaudet說,“為了安全起見,請始終要求您的供應(yīng)商提供測試結(jié)果以證實(shí)營銷聲明,并仔細(xì)檢查測試方法和結(jié)論。
“清洗培養(yǎng)箱的基本任務(wù)幾乎沒有改變,重要的是定期清潔內(nèi)部,以確保清除溢出的媒體,舊文化,灰塵和污垢,”貝茨說。Thermo Fisher Scientific建議**少每月進(jìn)行一次清潔并每兩周更換一次加濕器水。當(dāng)談到清潔時(shí),貝茨補(bǔ)充說,“越來越多的公認(rèn)的是揮發(fā)性有機(jī)化學(xué)品,如漂白劑或酚類對培養(yǎng)細(xì)胞的負(fù)面影響,因此我們建議只使用基于季銨的消毒劑和/或70%的乙醇在用溫和洗碗皂清洗后進(jìn)行手動(dòng)消毒“。她指出,這兩種溶液對細(xì)胞都是安全的。
Gaudet補(bǔ)充說:“氣化的過氧化氫生物消毒方案現(xiàn)在可用,在足夠高的濃度,如15%的H 2 O 2 -完全殺死各種各樣的污染微生物,包括孢子。”她指出,這加速了過程從一個(gè)典型地12小時(shí)或更多**小于4小時(shí)。不過,她鼓勵(lì)客戶分析公司測試。此外,她說,“了解什么微生物是主要關(guān)注的,并檢查測試方法和結(jié)論,以合理地確保它將幫助您實(shí)現(xiàn)您的目標(biāo)。
此外,法GG家科學(xué)研究中心(CNRS)的助理教授讓·皮埃爾·戈麥斯在奧爾良,在清洗后噴灑水浴缸消毒劑AnioSpray。
一些裝置提供用于消毒的其它選項(xiàng)。Bates說,“新的自動(dòng)化Thermo Scientific Steri-Run滅菌周期為消毒CO2培養(yǎng)箱提供了一個(gè)完整而快速的方法,無需高壓滅菌或使用苛刻的化學(xué)消毒劑。”她補(bǔ)充說,“47個(gè)位置的詳細(xì)溫度測繪表明,所有區(qū)域達(dá)到指定溫度,意味著微生物可以存活的冷點(diǎn),如在其他培養(yǎng)箱中可以發(fā)現(xiàn)的。
為了確保二氧化碳培養(yǎng)箱滿足實(shí)驗(yàn)室的需要,請仔細(xì)考慮您需要的功能,然后確保供應(yīng)商能夠證實(shí)所有關(guān)于防護(hù)和消毒設(shè)備的聲明。使用正確的設(shè)備和仔細(xì)的方法,您應(yīng)該能夠減少實(shí)驗(yàn)室中的污染問題。