培養(yǎng)箱可以代替恒溫水浴鍋嗎?下面就是這類問題的答案咯!
恒溫水浴鍋的特點(diǎn)是下面加熱,即使水浴鍋上面蓋著蓋子,保溫效果也不可能很好,水面上的溫度肯定低于37度,這樣使得液體揮發(fā),時(shí)間越長揮發(fā)越多,致使體系改變。因?yàn)樗】倳?huì)在管壁產(chǎn)生霧氣,蒸發(fā)掉些水,自然就不準(zhǔn)了,濃度什么的。空氣浴就不存在這個(gè)問題。不過溫度一定要準(zhǔn),用水銀溫度計(jì)調(diào)。
培養(yǎng)箱是氣浴,酶切管四周都是37度,可以保證液體不會(huì)揮發(fā),體系不**于改變,從這點(diǎn)上來說要優(yōu)于水浴。但是,氣浴升溫較慢,這一點(diǎn)又不及水浴。過夜酶切的話,這點(diǎn)時(shí)間相對(duì)來說是很短的了。
另外,恒溫水浴鍋一般剛打開的時(shí)候,溫度會(huì)升高到高于設(shè)定的溫度,然后再慢慢回調(diào)、穩(wěn)定。因此,一般酶切的時(shí)候,先打開水浴鍋一段時(shí)間后,再加樣酶切。酶切反應(yīng)強(qiáng)烈建議在水浴中進(jìn)行,其他酶反應(yīng)也一樣??諝庠≈蟹磻?yīng)體系中的成分會(huì)揮發(fā)出去,即使你的管子蓋得再緊。
為了防止揮發(fā)到倒著放也不可取。如果體系比較小,倒過來會(huì)大大減小酶和底物的接觸機(jī)會(huì)。
因?yàn)殚_始酶切溶液本身的溫度要小于37度,所以無論放在哪里,在**開始的時(shí)候都會(huì)產(chǎn)生蒸發(fā)現(xiàn)象,這是個(gè)必然現(xiàn)象。但是隨著時(shí)間的延長,當(dāng)內(nèi)外溫度都達(dá)到37度后,就不會(huì)有蒸發(fā)了。所以酶切反應(yīng)體系會(huì)有較小的波動(dòng),我想是否可以當(dāng)內(nèi)外溫度恒定后,立即放到離心機(jī)中甩一下。